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  • MIG(CXCL9)表达载体构建及体外活性鉴定

    作者:张汝;田聆;肖飞;文艳君;李炯;侯建梅;张伶;李刚;姚兵;陈县城;梅开

    目的构建MIG(CXCL9)真核表达载体,为利用MIG研究肿瘤基因治疗奠定基础.方法从pBLAST-MIG上切下含MIG全长的cDNA序列,定向插入pORF-mcs真核表达质粒,构建pORF-MIG重组质粒;然后经酶切分析和测序鉴定后,通过脂质体介导转染COS-7细胞;再进一步用免疫印迹法鉴定重组质粒的表达活性,用趋化试验鉴定生物学活性.结果 pORF-MIG重组质粒经酶切分析和测序证实含有MIG 的全长cDNA序列,转染COS-7细胞后高效表达MIG蛋白,对活化的淋巴细胞有趋化作用.结论成功构建了MIG(CXCL9)真核表达质粒,为进一步利用pORF-MIG研究恶性肿瘤基因治疗奠定基础.

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