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TIF3cDNA 稳定转染 CHO细胞 COS7细胞 Western Blot文献资料
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TIF3转基因CHO和COS7细胞株的构建与鉴定
目的构建TIF3转基因CHO和COS7细胞株并对其构建的细胞株进行鉴定。方法 采用磷酸钙介导转染技术和G418细胞筛选法,以pcDNA3.1/V5-His-TOPO为表达载体,构建TIF3转基因CHO和COS7细胞株;并应用Western Blot技术对转基因表达产物进行分析与鉴定。实验设计分无转染组、载体转染组和目的基因转染组。结果 在7株转染的CHO细胞株中,有3株具有高效稳定表达的TIF3编码蛋白质;在4株转染的COS7细胞株中有2株同样具有高效稳定的TIF3编码蛋白质表达。结论 本研究成功地构建了3株TIF3转基因CHO细胞株和2株TIF3转基因COS7细胞株,它们对今后镉化物相关癌基因的发现及其他生物学功能的研究具有重要的应用价值。