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  • HPLC法间接测定人和猪红细胞硫嘌呤甲基转移酶活性及其差异分析

    作者:王莉娜;张璘;南峰;程惊秋;步宏;梁茂植;陆燕蓉

    目的建立测定红细胞内6-甲基-巯基嘌呤(6-MMP)浓度的HPLC法,换算出红细胞和肝组织中硫嘌呤甲基转移酶(TPMT)活性,探讨猪与人肝脏TPMT酶活性的差异.方法使用岛津2010C系列高效液相色谱仪,Symmetry C 18(150 mm×3.9 mm,5 μm)色谱柱.样品用乙酸乙酯萃取后进样,0.1%的乙酸∶甲醇为流动相梯度洗脱,总流速1.0 mL/min,280 nm波长检测,内标法定量.结果标准曲线在6.25~100 nmol/mL范围内有良好线性,方法回收率为98.08%~100.05%,萃取回收率为88.1%~92.4%,批内RSD为1.0%~1.5%,批间RSD为1.0%~4.4%.测定显示人TPMT活性为(17.45±3.62)U,家猪TPMT活性为(7.65±1.35) U,版纳猪TPMT活性为(8.73±1.55) U.结论本方法适用于临床和科研中测定人和猪红细胞和肝组织TPMT活性.实验结果提示猪对嘌呤类药物的代谢能力低于人类.

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