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  • Western blotting中低丰度蛋白转膜方法改进

    作者:牟宏宇;罗波;何涛

    目的:改进Western blotting转膜方法,提高低丰度蛋白转膜效率.方法:在Western blotting转膜过程中,采用不同孔径的PVDF膜、不同的转膜时间及不同的甲醇含量进行转膜.转膜后,考马斯亮蓝染色观察PAGE胶上蛋白残留情况,ECL发光法检测FGFR1曝光强度.结果:通过改变膜孔径大小和转膜时间所得实验结果可见,孔径为0.22 μm的PVDF膜转移2h的转膜效率更高.通过改变转膜液中甲醇含量所得实验结果可见,甲醇含量为10%转膜效率更高.结论:本实验对Western blotting转膜过程中低丰度蛋白的转膜方法进行了成功改进,改进后能提高蛋白显影强度,具有广泛的应用前景,是一种方便可行的操作方法.

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