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  • HVEM重组腺病毒载体的构建与鉴定

    作者:冯嘉瑜;宋波;张艮甫;黄赤兵;王平贤;范明齐

    目的HVEM突变体和EGFP共表达复制缺陷型腺病毒载体的构建与鉴定.方法 RT-PCR获得人HVEM的cDNA,使其与LIGHT分子结合的表位点突变,保留与BTLA结合的关键位点.构建经修饰的HVEM基因的复制缺陷型腺病毒载体Adv-mHVEM-IRES2-EGFP并对其进行鉴定和转染效率测定.结果成功构建HVEM突变体和EGFP复制缺陷型腺病毒载体,经过测序与预期一致.该载体能够表达突变的HVEM和EGFP蛋白,体外培养细胞转染效率达到95%以上.结论构建的腺病毒载体能够共表达目的基因的产物HVEM突变体和EGFP蛋白,对体外细胞具有高效转染能力.

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