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吗啉基反义寡聚核苷酸文献资料
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一种在体基因干扰技术研究神经嵴细胞向平滑肌细胞的分化
目的 建立一种在体基因干扰技术研究神经嵴细胞向平滑肌细胞分化.方法 使用鸡胚在体电转染的方法导入绿色荧光蛋白示踪或核内不均—核糖核蛋白A2/B1(heterogeneous nuclear ribonucleprotein A2/B1,hnRNPA2/B1)特异性吗啉基反义寡聚核苷酸(morpholino)干扰其基因表达.通过分析鸡胚的成活率及转染率确定在体转染的设备参数,之后将胚胎固定、包埋、冰冻切片并进行免疫组织化学染色,在荧光显微镜下观察神经嵴细胞的标记、迁徙及向平滑肌细胞的分化.结果 转染电压为7.5V时胚胎成活率和转染率均较高,因此在本实验中作为标准电压.电转后6小时,右侧神经嵴细胞成功表达绿色荧光蛋白.第2天,神经嵴细胞开始向腮弓迁徙并达到第2、3鳃弓.hnRNPA2/B1 特异性morpholino可以抑制hnRNPA2/B1的表达从而影响神经嵴细胞的迁徙和分化,导致鳃弓动脉平滑肌层形成障碍,终破裂.结论 鸡胚在体基因干扰技术被成功建立并可用来研究神经嵴细胞向平滑肌细胞分化.
关键词： 神经嵴细胞 分化 平滑肌细胞 吗啉基反义寡聚核苷酸 HnRNPA2/B1
