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腹主动脉瘸文献资料
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抗人Cu/Zn SOD单克隆抗体的制备与鉴定
目的 制备抗人Cu/Zn SOD单克隆抗体并对其生物学特性进行簦定.方法 以人Cu/Zn SOD作为免疫原免疫Balb/e小鼠,取其脾细胞与SP2/0细胞融合,经多次筛选及克隆化,建立可稳定分泌抗人Cu/Zn SOD单克隆抗体的杂交瘤细胞株.用ELlSA、斑点ELISA、Western Blot、免疫组化鉴定单克隆抗体的特性,并测定其效价、亚型及相对亲和力.结果 筛选到一株可稳定分泌抗人Cu/ZnSOD单克隆抗体的杂交瘤细胞株4H10H4812,亚型鉴定重链为IgG2a,轻链为kappa链.ELISA法测定腹水效价为1:256,000,抗体相对亲和力为1.101×109mol/L.斑点ELISA、Western Blot显示抗体能特异识别免疫原、人肝细胞株HL-7702和人红细胞中的天然Cu/Zn SOD;不与鼠Cu/Zn SOD和人Mn SOD发生交叉反应.免疫组化进一步显示了人Cu/Zn SOD均匀分布于细胞的胞浆中.结论 成功制备了抗人Cu/Zn SOD单克隆抗体,为进一步研究其与腹主动脉瘤的关系奠定了基础.
