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  • 干细胞转染CMV-Luciferase-PGK-Puro慢病毒后化学发光成像

    作者:阮光萍;刘菊芬;李自安;王金祥;吕燕波;庞荣清;潘兴华

    目的 研究用化学发光成像的方法观察脐带间充质干细胞转染CMV-Luciferase-PGK-Puro慢病毒后的情况,代替活体成像仪的可行性.方法 用CMV-Luciferase-PGK-Puro慢病毒转染树鼩脐带间充质干细胞,用适浓度的嘌呤霉素筛选,存活的细胞用6孔板的3个孔培养,贴壁后,3个孔依次加入底物D-荧光素钾盐,用化学发光成像仪拍照,再用软件进行活体成像转换.将转染成功的细胞注入麻醉后的树鼩皮下,树鼩静脉注射底物.结果 细胞加入底物后有生物发光,发光强度随底物作用时间延长而减弱.树鼩皮下也观察到发光细胞.结论 CMV-Luciferase-PGK-Puro慢病毒能成功转染树鼩脐带间充质干细胞,转染成功的细胞用于动物模型治疗后,可进行活体成像,观察细胞在动物体内的分布.

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