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  • 大鼠脂肪源性干细胞分离培养及在尿道周围移植后的分布

    作者:田晓松

    目的:探索大鼠脂肪组织源性间充质干细胞的分离、体外培养方法,并采用阴部神经切断术的方法制作压力性尿失禁的大鼠模型,为其将来应用于大鼠压力性尿失禁治疗的动物试验研究提供实验依据.方法:无菌技术下获取SD大鼠双侧腹股沟区脂肪垫,消化离心,长期培养的方法获取脂肪源性间充质干细胞.倒置相差显微镜观察细胞形态变化,对培养细胞进行免疫细胞化学染色,鉴定其表面分子标志.结果:原代培养显示培养的脂肪源性间充质干细胞2d左右开始壁,10d-14d左右可达90%融合,基本上为梭形成纤维样细胞形态,免疫细胞化学示 CD29阳性,CD34阴性.阴部神经切断术后10天,除模型组和对照组一各有1只大鼠死亡外,均进行尿流动力学检测,三组手术前后ALLP分别为:对照组一为27.1±5.1和29.1±3.2cmH2O,对照二为29.5±4.9和27.4±72.3,模型组为24.8±3.8和14.7±3.0.模型组手术后ALLP明显降低,且组织学检查亦证明模型组大鼠尿道周围括约肌明显萎缩.结论:大鼠脂肪组织中含有大量间充质干细胞,细胞来源充足、取材容易、体外易于培养、细胞增殖数量大,是细胞移植理想的种子细胞.双侧PNT后大鼠控尿能力明显下降,可以作为SUI模型.本研究建立了获取大鼠脂肪组织源性间充质干细胞经及制作SUI大鼠模型的方法,为进一步实验研究提供了依据.

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