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MiR-199a-3p对大鼠肝细胞增殖的抑制作用
目的 探讨miR-199a-3p对体外培养SD大鼠BRL-3A增殖的影响.方法 人工合成miR-199a-3p模拟物、miR-199a-3p阻遏物及其各自阴性对照载体,分别转染BRL-3A肝细胞,转染后12 h、24h、48 h和72h,应用定量PCR分析细胞中Cyclin D1和PCNA mRNA表达水平,免疫组化方法观测Cyclin D1和PCNA阳性细胞比率,流式细胞仪检测细胞各周期比例和CCK 8法检测细胞增殖.实验分4组:mimics组,mi-nc组,in-hibitors组和in-nc组.结果 转染后24h、48 h、72 h,inhibitors组肝细胞Cyclin D1和PCNA mRNA表达水平较in-nc组显著增多(P＜0.05),而mimics组肝细胞Cyclin D1和PCNA mRNA表达水平较mi-nc组显著降低(P＜0.05).inhibitors组肝细胞Cyclin D1和PCNA阳性细胞比率均高于mi-nc组(P＜0.05),而mimics组肝细胞Cy-clin D1和PCNA阳性细胞比率均低于mi-nc组(P＜0.05).inhibitorss组肝细胞G0/G1期细胞比例明显低于in-nc组(P＜0.05),而mimics组肝细胞G0/G1期细胞比例明显高于mi-nc组(P＜0.05).同时,inhibitors组肝细胞S期细胞比例明显低于mi-nc组(P＜0.05)和in-nc组(P＜0.05).inhibitors组肝细胞增殖能力明显高于in-nc组(P＜0.05),mimics组肝细胞增殖能力明显低于mi-nc组(P＜0.05).结论 miR-199a-3p能够延长大鼠BRL-3A肝细胞周期和抑制肝细胞增殖,其作用可能与抑制Cyclin D1和PCNA的表达有关.
