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  • 细菌双杂交验证古菌UDG与TRX相互作用的研究

    作者:张璐;张闻;陈元晓

    目的 验证别府硫化叶菌(Sulfolobus tokodaii,S.tokodaii) DNA 碱基切除修复中重要的酶-尿嘧啶-DNA 糖基化酶(uracil - DNA glycosylase,StoUDG) 与硫氧还蛋白(thioredoxin,StoTRX) 之间的相互作用,方法 将StoUDG 和StoTRX 的基因分别克隆到细菌双杂交载体上,共转化至报告菌株,从筛选平板上检测StoUDG和StoTRX 相互作用的强弱.结果(1) pBT-TRX 与pTRG-UDG 等细菌双杂交质粒共转化至报告菌株,可使报告菌株在含氯霉素、四环素和卡那霉素的LB 平板上生长; (2) 含pBT-TRX 与pTRG-UDG 质粒的细菌双杂交报告菌株可在筛选平板上缓慢生长,且不发生自激活.结论 StoUDG 与StoTRX 存在较弱的相互作用,提示StoTRX参与依赖于StoUDG 的DNA 碱基切除修复过程,

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