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香烟烟雾提取物抑制树突状细胞诱导CD4+T细胞分化为CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞
目的 探讨香烟烟雾提取物(CSE)暴露及抑制CD40-CD40L路径对小鼠髓源性树突状细胞(BMDC)诱导CD4+T细胞分化为CD4+ CD25+ Foxp3+调节性T细胞(Treg)的影响.方法 使用40 ng/mL重组小鼠粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(rmGM-CSF)和10 ng/mL重组小鼠白细胞介素4(rmIL-4)联合诱导无特定病原体级健康雄性BALB/c小鼠骨髓来源的单个核细胞分化为树突状细胞(DC),流式细胞术检测小鼠BMDC表面CD40分子的表达,再采用免疫磁珠分选的方法从BALB/c小鼠脾脏细胞分离出CD4+T细胞.将所培养出的小鼠BMDC与正常对照组小鼠脾脏细胞分选的CD4+T细胞共培养,加入CSE及拮抗性CD40抗体,作用24h;流式细胞术观察各组细胞CD4+ CD25+ Foxp3+ Treg的变化,液相芯片技术检测细胞上清液白细胞介素10(IL-10)、IL-6的水平.结果 BMDC与CD4+T淋巴细胞共培养可以促进CD4+ CD25+ Foxp3+ Treg分化,经CSE刺激后,流式细胞术检测显示小鼠BMDC与CD4+T细胞共培养后分化的CD4+ CD25+ Foxp3+ Treg数量降低,细胞上清液IL-10降低、IL-6的水平升高;而加入拮抗性CD40抗体细胞共培养组CD4+ CD25+ Foxp3+ Treg增加,液相芯片检测细胞上清液IL-10上升、IL-6的水平下降.结论 CSE减少CD4+ CD25+ Foxp3+ Treg数量,体外使用拮抗性抗CD40抗体阻断CD40-CD40L通路可以促进CD4+T细胞分化为CD4+ CD25+ Foxp3+ Treg.
