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双标记免疫组化染色法文献资料
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年龄对人细胞毒性T淋巴细胞和自然杀伤细胞中穿孔素表达的影响
目的通过研究健康儿童、成人和老年人外周血淋巴细胞(PBL)中细胞毒效应分子穿孔素(PFP)的表达水平的变化, 了解细胞毒性T细胞(CTL )的杀伤活性随年龄增长而下降的分子机制.方法利用抗人PFP、抗人CD3和抗人CD56单克隆抗体(mAb), 采用单标记免疫组化染色法, 检测外周血单个核细胞(PBMC)中PFP的表达.采用双标记免疫组化染色法, 检测上述细胞表面标志CD3或CD56的表达和细胞内PFP的表达. 结果儿童组、成人组及老年组PBL中表达PFP阳性细胞的百分率(%), 分别为(26.4±2.7)%, (21.6±3.2)%和(13.4±2.0)%, 老年组明显下降, 与其他两组相比较P<0.001.3个年龄组 CD3+ T细胞表达PFP的阳性率(%), 分别为(30.1±4.8)%、 (21.4±7.3)%和(18.8±4.2)%, 随年龄的增长而显著下降. 3个年龄组CD56+ NK细胞PFP的表达差别不显著.结论健康人PBL中PFP的表达随年龄增长而递减, CD3+ T细胞亚群PFP表达水平的下降尤其显著.这可能是老年人CTL杀伤活性下降的重要原因之一.
关键词： 穿孔素 细胞毒性T淋巴细胞 自然杀伤细胞 双标记免疫组化染色法
