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血管内皮钙黏蛋白(VECDH5)文献资料
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人血管内皮钙黏蛋白5单克隆抗体的制备及应用
目的 制备并鉴定人血管内皮钙黏蛋白5(VECDH5)的单克隆抗体(mAb).方法 用重组原核人VECDH5蛋白免疫BALB/c小鼠,利用杂交瘤技术进行细胞融合;间接ELISA筛选阳性克隆,得到稳定分泌抗VECDH5抗体的杂交瘤细胞株,ELISA测定其效价;Western blot法、流式细胞术、免疫荧光细胞化学染色、免疫组织化学染色鉴定其特异性及抗原表位.结果 制备并获得1株可分泌特异性抗VECDH5的杂交瘤细胞株(2C11).ELISA测定腹水效价高达1∶10 000.多种方法均证实该抗体能特异性识别人VECDH5蛋白,并可在上述不同方法中应用.经抗原表位鉴定,研究制备的2C11识别的氨基酸序列为LDREVVPWYNLTVEA.结论 成功制备了亲和力高、特异型好的抗人VECDH5的mAb.
关键词： 血管内皮钙黏蛋白(VECDH5) 单克隆抗体 鉴定
