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随机突变PCR文献资料
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定点突变和随机突变PCR构建噬菌体突变次级抗体库方法的比较
目的 以突变TomlinsonⅠ库中筛选的抗细胞黏附分子L1的胞外区单链抗体为例,对定点突变和随机突变两种构建噬菌体抗体次级库的方法进行比较.方法 设计定点突变和随机PCR引物在基因水平经PCR、酶切、连接将已有噬菌粒引入突变后转染大肠杆菌构建噬菌体次级抗体库；之后使用噬菌体ELISA确定阳性单克隆比例,采用皮尔森x2检验进行比较.结果 两种方法构建的次级抗体库库容分别为1.4×106 pfu/mL和2.5×106 pfu/mL,两库阳性单克隆比例分别为32.5％和35.5％,二者相比差异无统计学意义(P＞0.05).结论 两种突变方法都有望获得高亲和力的抗体.
