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  • 抗志贺样毒素Ⅱ型变异体单克隆抗体的制备及特性鉴定

    作者:杨健美;高崧;林矫矫;刘金明;陈兆国;傅志强;刘秀梵

    志贺样毒素Ⅱ变异体(SLT-Ⅱe)是猪水肿病的主要致病因子之一, 为了制备SLT-Ⅱe单克隆抗体(mAb), 我们从TB1菌中用多粘菌素诱导提取了SLT-Ⅱe蛋白, 并且用硫酸铵盐析沉淀法对该蛋白进行了提纯, 以提纯蛋白免疫BALB/c小鼠, 利用杂交瘤细胞技术制备mAb.细胞融合后, 培养上清经间接ELISA检测, 共得到3株阳性杂交瘤细胞2E11、2H9和4F3, ELISA效价分别为1∶ 213、1∶ 213和1∶ 28, 3株杂交瘤细胞培养上清分泌的mAb在Western blot试验中均与提纯的毒素蛋白反应, 在Vero细胞中和试验中均能够中和毒素对Vero细胞的毒性作用, 从而为临床分离株SLT-Ⅱe产生的免疫学检测方法奠定了一定的基础.

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