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  • 抗rhNDPK-A单克隆抗体的制备及鉴定

    作者:李雪玲;王一飞;熊盛;张美英;李冰;李久香;王红;郑佐娅;王从朱

    目的:研制抗rhNDPK-A(recombinant human nucleoside diphosphate kinase-A)单克隆抗体(mAb), 并鉴定其特性.方法:以纯化的rhNDPK-A免疫BALB/c小鼠, 采用杂交瘤技术制备抗rhNDPK-A mAb; 用免疫双扩散鉴定Ig亚类; Western blot鉴定mAb的特异性; 间接ELISA检测mAb的腹水效价、亲和常数, 并进行表位分析.结果:获得6株可分泌特异性mAb的抗 rhNDPK-A的杂交瘤细胞系2D9、8C7、13E2、15D9、15E3和20D9, Ig亚类均为IgG1; 其效价为1×10-4~5×10-6; 亲和常数为4.5×10-9~2.8×10-10 mol/L; 共有3个抗原表位. 结论:获得抗rhNDPK-A的mAb, 为进一步用于临床诊断和实验研究创造了条件.

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