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  • 免疫亲和层析纯化大肠癌相关抗原

    作者:杨勇;李郁;王贤辉;商澎;汪莉;骞爱荣;姚西英;陈志南

    目的: 从培养的大肠癌细胞Hce-8693中分离纯化并鉴定大肠癌相关抗原.方法: 利用流式细胞术选择高表达大肠癌相关抗原的大肠癌细胞系, 分别用单去污及三去污裂解液裂解细胞.然后用5株抗大肠癌单克隆抗体(mAb)CYL-1~ CYL-5进行Western blot, 分析与大肠癌细胞结合反应强的mAb.以此mAb作为配基进行亲和层析纯化大肠癌相关抗原, 纯化结果利用Western blot法进行鉴定 .结果: 大肠癌细胞系Hce-8693上相关抗原的表达量高; 抗大肠癌mAb CYL-2与Hce-8693的结合力强.纯化所获与CYL-2特异结合的大肠癌相关抗原, Mr约为13×103.该抗原由Mr为60×103和70×103 两种亚基组成.结论: 利用mAb CYL-2进行亲和层析, 从大肠癌细胞系Hce-8693中获得纯化的肿瘤相关抗原.

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