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CD226(PTA1)文献资料
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含3C蛋白酶切位点的人CD226胞膜外区Ig融合蛋白的真核表达及应用
目的: 构建含3C蛋白酶酶切位点的人CD226(PTA1)分子胞膜外区Ig融合蛋白编码基因的真核表达载体,并进行表达和初步鉴定. 方法: 将人CD226分子的胞膜外区基因, 克隆入含3C蛋白酶靶序列的Ig真核表达载体p-3C-Ig中.测序证实后, 转染COS7细胞并进行瞬时表达.表达产物经亲和层析柱纯化, 并通过免疫荧光染色及3C蛋白酶酶切反应进行鉴定. 结果: 经表达和纯化获得CD226胞膜外区的Ig融合蛋白. 该融合蛋白可与表达于ECV304细胞表面的CD226配体有效结合.同时, 融合蛋白的Fc段亦经3C蛋白酶切除, 从而获得CD226胞膜外区的真核表达分子.结论: 成功地获得了含有3C蛋白酶酶切位点的人CD226分子胞膜外区Ig真核表达产物, 为进一步对CD226分子进行结构和功能研究, 以及X线结晶衍射提供了重要条件.
关键词： CD226(PTA1) 真核表达 融合蛋白 3C蛋白酶
