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小鼠诱导多功能干细胞文献资料
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甲状腺素促进miPS细胞向心肌细胞分化的非基因机制的作用
目的 探讨三碘甲腺原氨酸(thyroxine,T3)在诱导小鼠诱导多能干细胞(miPSC)向心肌细胞分化过程中非基因的机制作用.方法 培养Oct4-GFP+ miPS细胞,利用悬滴培养形成拟胚体(embryoid body,EB)的方法诱导miPSC向心肌细胞分化,在诱导过程中分别添加甲状腺素T3和甲状腺素类似物三碘甲腺乙酸(triiodothyroacetic acid,Triac).实验共分对照组、T3处理组、T3+ Triac处理组.分别在诱导分化第4、6和12天,在倒置显微镜下观察细胞的分化情况,采用免疫荧光染色法检测分化第12天心肌细胞特异性结构蛋白α-actinin及肌钙蛋白(cardiac troponin,cTn)T的表达,Western blot法检测cTnT和p-JNK/JNK的表达情况.结果 诱导分化第4、6和12天,T3处理组跳动EB数量明显多于对照组和T3+ Triac组(P＜0.05);免疫荧光染色显示T3处理组的α-actinin和cTnT表达量较对照组和T3+riac组明显增强(P＜0.05);Western blot结果表明T3显著提高cTnT的表达量(P＜0.05);细胞内信号分子JNK蛋白的磷酸化水平明显大于对照组和T3+ Triac组(P＜0.05).结论 甲状腺素通过的非基因机制促进miPS细胞向心肌细胞分化,这种作用机制可能跟JNK信号通路有关.
关键词： 甲状腺素 心肌细胞 小鼠诱导多功能干细胞 JNK
