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Hedgehog-Gli信号通路调控EMT驱动前列腺癌干细胞特性形成的初步实验研究
目的 探索上皮间质转化EMT与肿瘤干细胞之间潜在联系及相关机制.方法 应用免疫组织化学染色方法检测前列腺癌组织中肿瘤干细胞标志物表达情况.应用Q-PCR及Western blot方法检测分析ARCaPE和ARCaPM细胞中EMT及肿瘤干细胞相关标志物表达水平.应用细胞集落形成实验比较ARCaPE和ARCaPM细胞增殖能力.应用肿瘤克隆球形成实验检测细胞克隆形成和自我更新能力.应用GANT61封闭Hedgehog-Gli信号通路,分析Hedgehog-Gli通路阻断后ARCaPM细胞EMT及干细胞特性的变化.结果 CD44在前列腺癌中表达下调,且与分级相关,高级别(Gleason≥8)前列腺癌组织中下调更明显;Nanog在高级别前列腺癌中有表达增高现象;而CD133在前列腺良性增生中和前列腺癌中均为阴性染色.具有间质细胞样形态的ARCaPM细胞迁移侵袭能力较具有上皮细胞样形态的ARCaPE细胞明显增强,E-cadherin表达降低,N-cadherin、Vim-entin、Snail表达增加.ARCaPM细胞中肿瘤干细胞分子标志物表达增高,其增殖及自我更新能力均明显增强.Gli1在AR-CaPM细胞中表达增高,Gli抑制剂GANT-61可以有效抑制ARCaPM细胞EMT转化,降低其肿瘤干细胞分子标志物表达水平,抑制其增殖及自我更新能力.结论 Hedgehog-Gli信号通路调控的EMT可驱动前列腺癌细胞肿瘤干细胞特性形成.
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七氟醚对卵巢癌干细胞特性及增殖、侵袭迁移能力的影响
目的 探究七氟醚对卵巢癌细胞SKOV3干细胞特性及增殖、侵袭迁移能力的影响.方法 常规培养人卵巢癌细胞SKOV3于培养瓶中,分为七氟醚组及对照组,七氟醚组以5％ CO2和1％七氟醚培养24 h,对照组仅以5％ CO2培养24 h,MTT法检测两组细胞增殖能力的变化,Transwell侵袭及迁移实验检测细胞侵袭及迁移能力,Western blotting检测两组细胞干细胞特性相关分子(Oct4及Sox2)及上皮间充质转化(EMT)相关分子(E-cadhefin、Vimentin)的表达差异.结果 七氟醚组细胞72、96 h时间点增殖能力显著低于对照组,差异具有统计学意义(P＜0.05).七氟醚组穿透Matrigel基质胶的细胞数、迁出Transwell上小室的细胞数均明显少于对照组,差异具有统计学意义(P＜0.05).七氟醚组Oct4、Sox2、Vimentin表达均显著低于对照组,E-cadhefin表达显著高于对照组,差异具有统计学意义(P＜0.05).结论 七氟醚可通过减轻卵巢癌细胞EMT进程及干细胞特性,抑制细胞增殖及侵袭迁移能力.
