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张应力加载下PLGA-胶原类细胞外基质三维支架复合培养大鼠成肌细胞“整合素β1”的表达
目的:利用PLGA(poly lactide-co-glycolide)-胶原类细胞外基质复合支架构建大鼠成肌细胞体外三维力学加载模型并研究周期性机械张应力对不同方式培养的大鼠成肌细胞“整合素β1”基因表达的影响.方法:静电纺丝法制备PLGA-胶原类细胞外基质复合生物支架并将其粘接于加力板上,与体外培养的大鼠成肌细胞进行复合培养；使用“Force1”四点弯曲细胞应变加载装置分别对三维培养和二维培养的大鼠成肌细胞进行生理限度内的力学加载；利用RT-PCR技术检测不同时间点细胞整合素β1mRNA的表达；比较张压力作用下,三维PLGA-胶原复合支架上和二维平面培养细胞整合素β1基因表达水平的差异.结果:除加载15min外,相同强度张应力作用的各个时间点,三维支架上细胞整合素β1的表达均明显高于二维平层培养细胞；且三维支架上细胞整合素β1的表达水平更快达到峰值,而且峰值持续时间也显著增加.结论:周期性张应力刺激下,三维复合培养大鼠成肌细胞整合素β1mRNA表达水平明显高于二维培养细胞,这表明培养方式及细胞外基质的三维空间结构对加载早期细胞的力学信号转导有着十分重要的作用.
关键词： PLGA-胶原复合支架 整合素β1 力学信号转导 三维培养 -
机械张应力刺激对PLGA-胶原复合培养大鼠成肌细胞整合素偶联激酶表达的影响
目的 研究PLGA(poly lactide-co-glycolide)-胶原复合支架上大鼠成肌细胞体外张应力作用下整合素偶联激酶(ILK)的表达变化,探索其力学信号转导过程.方法 体外培养大鼠成肌细胞,实验组接种于黏附有PLGA胶原复合生物支架的加力板,对照组接种于空白加力板,然后使用“Forcel”四点弯曲循环应变加载装置加载.利用RT-PCR技术,检测不同时间点细胞ILK mRNA的表达,比较三维PLGA-胶原复合支架上和二维平面上培养的细胞在张应力作用下基因水平的表达差异.结果 张应力刺激下,同一时间点三维支架上细胞ILK的表达明显高于二维平面上的细胞；在加载过程中,三维支架上细胞ILK的表达水平明显提高,而且更快达到峰值.结论 培养环境的三维空间结构对细胞在力学刺激作用下的初期反应起重要作用.
关键词： PLGA-胶原复合支架 张应力 成肌细胞 力传导 整合素偶联激酶
