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黄芪甲苷对氧糖剥夺复氧后星形胶质细胞上TNF-α与AQP-4表达的影响
目的:探索黄芪甲苷(astragaloside Ⅳ,ASIV)对氧糖剥夺复氧(oxygen glucose deprivation/reperfusion,OGD/R)后星形胶质细胞上肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis facror-alpha,TNF-α)与水通道蛋-4(aquaporin-4,AQP-4)表达的影响.方法:选用第二代第1d的星形胶质细胞.将星形胶质细胞放入缺氧培养箱(1％O2、94％N2、5％CO2),分别干预1、2、3、4h,复氧24 h后用RT-PCR和Western Blot检测AQP-4和TNF-α的表达情况.将星形胶质细胞分为对照组、OGD/R组、OGD/R +0.001 μmol/ml ASIV组、OGD/R +0.01μmol/ml ASIV组,用RT-PCR和免疫荧光检测AQP-4和TNF-α的表达情况.结果:RT-PCR和Western Blot结果显示:氧糖剥夺复氧后AQP-4和TNF-α的表达均增加,且AQP-4在OGD3 h时表达达到高峰,TNF-α在OGD1 h时表达达到高峰(P＜0.05);OGD3h+ 0.001 μmol/ml ASIV组和OGD3 h +0.01 μmol/ml ASIV组的AQP-4基因表达水平较OGD3 h组相比均明显降低(P＜0.05);与OGD3 h组相比,OGD3 h +0.001μmol/ml ASIV组的AQP-4蛋白表达水平明显降低(P＜0.05);OGD1 h +0.001 μmol/ml ASIV组和OGD1 h+0.01μmol/ml ASIV组的TNF-α基因表达水平与OGD1 h组相比均明显降低(P＜0.05);与OGD1 h组相比,OGD1 h +0.001 μmol/ml ASIV组的TNF-α蛋白表达水平明显降低(P＜0.05).结论:氧糖剥夺复氧模型可以诱导星形胶质细胞上TNF-α和AQP-4的表达,且TNF-α的表达先于AQP-4;黄芪甲苷可能是通过下调TNF-α的表达来影响AQP-4的表达,进而影响细胞水肿.
