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AHNAK1文献资料
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shRNA 静默 CD4+T 细胞 AHNAK1基因对小鼠甲状腺相关性眼病进程的抑制作用
目的:构建表达小鼠CD4+T细胞钙支架蛋白AHNAK1的短发夹RNA(short hairpin RNA ,shRNA)慢病毒载体,并研究其对小鼠甲状腺相关性眼病( thyroid-associated ophthalmopathy ,TAO)的抑制效应。
方法:设计并筛选对AHNAK1具有良好干扰效力的shRNA序列,慢病毒载体包装干扰序列,感染小鼠CD4+T细胞,检测AHNAK1静默对T细胞功能的抑制作用,采用实验动物模型观察AHNAK1体内抑制甲状腺相关性眼病的效果。
结果:成功筛选出具有良好干扰效力的shRNA ,并包装入慢病毒。病毒滴度为1.0×106 TU/mL,转染慢病毒的CD4+T细胞展现出失能倾向,抑制炎症免疫反应;在动物模型中抑制T细胞中AHNAK1表达可以有效控制甲状腺眼病的发生发展,显著降低治疗组T细胞中IL-2、IL-1β和IFN-γ的表达。
结论:成功构建了表达小鼠AHNAK1 shRNA的慢病毒,具有抑制T细胞分泌IL-2、IL-1β和IFN-γ的表达效应,能够有效抑制甲状腺眼病的发生发展。