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  • 脂多糖诱导成牙本质细胞凋亡模型的建立与评价

    作者:童娟;殷广;罗颖;王胜朝;尹秋蓉;胡轶

    目的:建立并评价脂多糖(LPS)诱导的成牙本质细胞(OB)凋亡模型.方法:采用梯度LPS(0、0.1、1、10、100μg/mL)刺激法诱导小鼠OB细胞系MDPC-23细胞凋亡;分别于诱导后24、48、72、96 h各时间点,以MTT法检测细胞增殖活力,流式细胞术检测细胞凋亡比例,确定合适的诱导浓度和时间后,建立OB细胞凋亡模型,并通过Hoechst染色观察细胞形态和凋亡比例.结果:0.1μg/mL和1 μg/mL的LPS作用24h可明显促进MDPC-23细胞增殖,72 h后则明显抑制细胞增殖(P<0.05);当LPS浓度大于1μg/mL时,对细胞的影响以毒性作用为主.在各个时间点不同浓度的LPS均可诱导MDPC-23细胞凋亡,其中以0.1μg/mL的LPS诱导MDPC-23细胞凋亡的效果较理想.Hoechst染色显示0.1μg/mL LPS可诱导细胞出现典型的凋亡形态学特征,且随着LPS作用时间的延长,凋亡细胞比例逐渐增高(P<0.05),但96 h时有大量细胞死亡.结论:LPS诱导MDPC-23细胞凋亡的合适浓度为0.1μg/mL,合适作用时间为24~72 h.

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