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  • 人牙成釉细胞相关蛋白启动子的克隆和转录活性分析

    作者:韩婷婷;刘晓影;郝建忠;高玉光

    目的:构建人牙成釉细胞相关蛋白(odontogenic ameloblast-asssociated protein,ODAM)基因不同长度的上游启动子荧光素酶报告基因载体,比较不同的启动子片段在成釉细胞、Hela细胞中的活性,为进一步判定上游启动子的转录调控区奠定基础.方法:以PCR方法获取基因上游启动子片段,将其构建至报告基因载体pGL3-Basic中,瞬时转染成釉细胞及Hela细胞,通过检测荧光素酶活性来分析启动子区域的转录调控能力.结果:成功地获得了不同长度的ODAM基因启动子目的片段,酶切鉴定表明不同长度启动子荧光素酶报告基因载体构建成功,不同长度的启动子在不同的细胞中活性不同,-333~~-195与-195~~-96区域为特异的转录调控作用区.结论:初步确定了ODAM基因启动子的转录活性区,为进一步研究该基因转录调控特点奠定基础.

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