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二次酶消化法文献资料
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小鼠牙囊细胞体外培养方法与形态特征探讨
目的：：探讨小鼠牙囊细胞的体外培养方法并观察其形态特征。方法：体视显微镜下分离出生3~5d仔鼠牙胚,用I型胶原酶消化后分离牙囊组织,采用酶消化-组织块法和二次酶消化法进行牙囊细胞的原代及传代培养,倒置显微镜下进行细胞形态学观察。结果：酶消化-组织块法经4~5 d,部分组织块周围见细胞呈放射状爬出,2周后细胞集落仍难以汇合,无法传代。二次酶消化法第2天可见散在细胞集落形成,4~5d细胞接触汇合。传代发现,多角形细胞消失,第2代后梭形细胞占大多数,第3代细胞生长速度快,第4代细胞增殖速度减慢,第5代后细胞趋于静止；随着传代次数的增加胞体逐渐增大,可出现一些树突形细胞。结论：采用二次酶消化法进行小鼠牙囊细胞原代培养可在短时间内获得较多的细胞,操作简便且成功率高,细胞形态随培养时间而变化多样。
