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β-酪蛋白基因5'侧序列文献资料
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西农萨能奶山羊β-酪蛋白基因5'侧序列通用表达载体的构建
目的: 检测β-酪蛋白基因5′侧序列的启动BglⅡ效果及构建真核表达载体pcDNA3.1-65.方法: 采用SalⅠ和BamHⅠ对pMD-T/65双酶切,得到6465 bp的β-酪蛋白基因5′侧序列;将启动子片段插入到XhoⅠ和BglⅡ双酶切后的pGL3-Basic载体里;获得重组报告基因载体pGL3-B65.瞬时转染西农萨能奶山羊原代培养的乳腺上皮细胞,检测β-酪蛋白基因5′侧序列的启动效果.将β-酪蛋白基因5′侧序列插入真核表达载体pcDNA3.1(-)的XhoⅠ和BamHⅠ位点之间,从而获得载体pcDNA3.1-65.结果: 长度为6465 bp的β-酪蛋白基因5′侧序列能有效地启动荧光素酶报告基因,并正确构建了真核表达载体pcDNA3.1-65.结论: 克隆的β-酪蛋白基因5′侧序列在转录水平上具有生物学功能,为进一步建立转基因动物乳腺生物反应器奠定了坚实的基础.
关键词： β-酪蛋白基因5'侧序列 西农萨能奶山羊 通用表达载体
