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病毒分离与纯化文献资料
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PEG6000沉淀结合差速离心方法浓缩水中脊髓灰质炎病毒
目的建立一种简便、有效的从细胞培养物中纯化PV1病毒的方法用于水病毒消毒实验. 方法 PV 1 Henan株在Hep-2细胞中增殖后用聚乙二醇(PEG)6000沉淀结合差速离心的方法纯化病毒. RT-PCR和透射电镜(TEM)鉴定提纯病毒的形态学和分子生物学特性. 结果 pH值7.5时终浓度70 g.L-1的PEG 6000沉淀病毒的感染性回收率(PFU计数)为79.2%,提纯系数(PF)为106,再经差速离心(16 000 g 30 min,100 000 g 4.5 h)浓缩病毒的感染性回性率和提纯系数分别为29.0%和168. RT-PCR和TEM终鉴定提纯物为PV 1 Henan株. 结论 PEG 6000结合差速离心的方法较之蔗糖密度梯度区带离心方法易于操作,且比单独PEG沉淀有更高的纯化系数,是一种简便、有效的方法.
