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原位缺口末端标记/诊断应用文献资料
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原位细胞凋亡TUNEL法的改进及其应用
目的:寻找一种能快速、准确检测以石蜡切片、冰冻切片与细胞爬片或涂片等为实验材料的原位细胞凋亡的TUNEL法.方法:在原已建立的TUNEL技术基础上作了如下改进:①石蜡切片用微波修复技术替代蛋白酶K的消化作用;冰冻切片与细胞爬片或涂片用含0.1%Triton X-100和0.1%枸橼酸三钠混合液作穿透处理.②在滴加反应混合物前,切片用0.1%焦碳酸二乙酯(DEPC)浸泡,抑制内源性核酸内切酶活性.③在POD转换剂前,切片用3%H2O2-甲醇液阻断内源性过氧化物酶活性,并用正常山羊血清封闭非特异结合位点.④苏木素套染细胞棱.结果:改进后的TUNEL法能特异地显示凋亡细胞为棕黄色,其他细胞核为蓝色,且对比明显,背景浅,组织结构完整清晰,便于显微照相等特点.结论:改进后的TUNEL法是一种快速、准确检测以石蜡切片、冰冻切片与细胞爬片或涂片等为实验材料细胞凋亡的有效方法.
关键词： 细胞凋亡 原位缺口末端标记/诊断应用 方法
