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  • 实时荧光定量测定人B细胞激活因子受体-BCMA基因表达水平

    作者:沈荣春;鞠少卿;王跃国;丛辉;徐云

    目的:研究建立实时荧光定量聚合酶链反应(RFQ-PCR)检测人B细胞激活因子受体-BCMA含量的方法,及探讨其外周血单个核细胞(PBMC)中BCMA mRNA表达的检测价值.方法:在BCMA基因高保守区设计特异性引物和荧光探针,用逆转录-PCR扩增目的片段实时检测产物的荧光强度,根据标准品建立标准曲线,由软件自动计算出待测样本中BCMA mRNA含量,并以 BCMA mRNA和β2 M mRNA含量的比值进行BCMA表达水平评价.结果:RFQ -PCR检测BCMA含量的线性范围为109 pg/ml ~101 pg/ml,低浓度样本批内和批间变异系数(CV)分别为13.5%和11.2%,高浓度样本批内和批间CV分别为8.9%和9.7%.30例健康献血员样本的PBMC中,90%(27例)检出有BCMA mRNA表达,范围为0.10~0.98.结论:RFQ-PCR检测BCMA mRNA含量的方法,具有较好的检测灵敏度和重复性.

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