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熄风胶囊对难治性癫痫大鼠海马Ⅰ型钠通道α亚基蛋白及mRNA表达的影响
目的:探讨熄风胶囊对氯化锂—匹罗卡品致难治性癫痫模型大鼠Ⅰ型钠通道α亚基蛋白及mRNA表达的影响.方法:建立氯化锂—匹罗卡品癫痫大鼠模型.实验大鼠随机分为8组:正常对照组(空白组)、模型对照组(模型组)、熄风胶囊低剂量组(熄低组)、熄风胶囊中剂量组(熄中组)、熄风胶囊高剂量组(熄高组)、卡马西平治疗组(CBZ组)、熄风胶囊中剂量+卡马西平组(熄卡组)、熄风胶囊中剂量+1/2卡马西平组(熄卡低组).熄低、中、高组分别予熄风胶囊0.33 g、0.66g、0.99g,浓缩剂2 mL;CBZ组予CBZ20 mg/kg;熄卡、熄卡低组分别予熄风胶囊0.66g和CBZ 20 mg/kg、CBZ 10 mg/kg;模型组和空白组分别予生理盐水2 mL.每天上午灌胃1次,共持续60天.给药结束后检测各组大鼠Ⅰ型钠通道α亚基蛋白及mRNA的表达.结果:1)免疫组化染色法示:与空白组比较,模型组SCN1A的表达高于空白组(P＜0.05);与模型组比较,各组治疗SCN1A的表达均低于模型组(P＜0.05);与CBZ组相比,熄卡组SCN1A的表达均低于CBZ组(P＜0.05);2)Western-blot示:与空白组比较,模型组SCN1A的表达高于空白组(P＜0.05);与模型组比较,各治疗组SCN1A的表达均低于模型组(P＜0.05);与CBZ组比较,熄卡低组SCN1A的表达低于CBZ组(P＜0.05);3)Real-t ime RT-PCR示:熄高组、熄中组、熄低组、熄卡组对SCN1A mRNA表达有抑制作用,而卡马组、熄卡低组对SCN1AmRNA表达有促进作用.结论:免疫组化、West ern-b lot、Rea l-t imeRT-PCR结果显示:与正常大鼠相比,IE大鼠海马SCN1A在蛋白与mRNA两个层面均表达上调.熄风胶囊可能通过抑制癫痫大鼠海马Ⅰ型钠通道α亚基蛋白及基因的表达抑制钠电流,从而降低癫痫反复自发性发作的可能.
