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PolyI∶C联合BCG-CpG复合佐剂对结核亚单位疫苗免疫效果的影响
目的：探讨聚肌胞苷酸(Poly I ∶ C)联合BCG-CpG复合佐剂(BCG-CpG-DNA+Al,简称BC02)对结核亚单位疫苗的免疫效果是否有增强作用。方法 BALB/c小鼠分成5组,3组分别免疫含有不同剂量poly I ∶ C (10、25、50μg/剂)的结核亚单位疫苗(Ag85b+ESAT6-CFP10)/(BC02+poly I ∶ C)3针,间隔10 d；2组分别免疫 PBS或(Ag85b+ESAT6-CFP10)/BC02作为对照。末次免疫后第7 d,分离脾淋巴细胞,进行抗原特异性的IFN-γ ELISPOT检测、ELISA检测和淋巴细胞增殖检测以评价细胞免疫应答。豚鼠分成4组,1组免疫含有50μg poly I ∶ C/剂的新亚单位疫苗(Ag85b+ESAT6-CFP10)/(BC02+poly I ∶ C)3针,间隔10 d；3组分别免疫(Ag85b+ESAT6-CFP10)/BC02疫苗、生理盐水和BCG作为对照。末次免疫30 d后,每只豚鼠皮下攻击250 CFU结核分枝杆菌。41 d后,解剖豚鼠,进行肝、脾、肺脏器综合病变评分和脾菌计数以评价保护力。结果含不同剂量poly I ∶ C的( Ag85b+ESAT6-CFP10)/(BC02+poly I ∶ C)疫苗免疫组小鼠的脾淋巴细胞分别经Ag85b和ESAT6-CFP10多肽刺激后,分泌IFN-γ的抗原特异性T细胞频数、IFN-γ分泌量和细胞增殖指数均较(Ag85b+ESAT6-CFP10)/(BC02)组大幅度提高,且应答强度与poly I ∶ C呈现较为明显的量效关系。(Ag85b+ESAT6-CFP10)/(BC02+poly I ∶ C)组豚鼠脏器综合病变指数(27.5±20.4)和脾菌分离数[(4.22±0.59) log10 CFU]均低于(Ag85b+ESAT6-CFP10)/BC02组[35.8±27.3,(5.19±0.66) log10 CFU],其中脾菌分离数的差异有显著统计学意义(P=0.0030)。结论 Poly I ∶ C佐剂对结核亚单位疫苗(Ag85b+ESAT6-CFP10)/BC02诱导的细胞免疫应答和抗结核保护力均有一定的增强效果。
