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狂犬病病毒aG株文献资料
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应用细胞工厂建立人用狂犬病疫苗连续培养多次收获工艺
目的:为提高生产效率、增加原代地鼠肾细胞单产量及狂犬病病毒产量,建立人用狂犬病疫苗(地鼠肾细胞)连续培养多次收获工艺。方法选用12~14日龄SPF地鼠,无菌取肾经消化,制备成细胞悬液,分装到40层细胞工厂并培养细胞成单层;接种狂犬病病毒固定毒aG株,连续培养病毒并多次收获。分别对同一细胞批制备的多个单次病毒收获液的免疫原性、病毒滴度和地鼠肾细胞蛋白质含量进行检测。结果用40层细胞工厂培养原代地鼠肾细胞和狂犬病病毒,细胞接种浓度为1.0×106~1.5×106cells /mL,(36±1)℃培养72 h成致密单层;按0.1 MOI病毒接种,可进行6次收获病毒;多个单次病毒收获液病毒滴度均不低于6.0 lgLD50/mL;免疫原性检查保护指数不低于100;地鼠肾细胞蛋白质残留量随着收获次数的增加而不断降低。结论用细胞工厂建立了人用狂犬病疫苗连续培养多次收获工艺,能显著提高地鼠肾单产量,增加产能。