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  • 细粒棘球蚴重组延伸因子-1基因的表达、纯化及免疫学鉴定

    作者:卜阳;李昭宇;师志云;马锐;于晶晶;于辛酉;赵巍

    目的 对构建细粒棘球蚴(Echinococcus granulosus,Eg)延伸因子-1(Elongation factor 1,EF-1)基因的重组质粒,并原核表达、纯化及对其免疫特性进行鉴定.方法 从重组质粒EF-1/pGEM-T中酶切出EF-1目的片段,亚克隆入表达载体pET28a,转化入大肠杆菌E.coli BL21(DE3)plysS进行融合表达,经His-band树脂纯化试剂盒小量纯化,SDS-PAGE和Western blot方法鉴定表达产物.结果 成功构建Eg.EF-1/pET28a/E.coliBL21基因工程菌株,诱导表达重组蛋白和纯化分离得到31KDa Eg.EF-1均能被细粒棘球蚴天然抗原免疫的兔多克隆抗血清识别.结论 初步证实该重组蛋白具有较好的抗原性.

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