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伊犁黑蜂蜂胶对变形链球菌属及其生物膜代谢影响研究
目的：探讨伊犁黑蜂蜂胶乙醇提取物（Ethanol extract of Propolis，EEP）与氟化钠（NaF）对致龋变形链球菌属产酸、产糖代谢关键酶乳酸脱氢酶（Lactate dehydrogenase， LDH ）与葡萄糖基转移酶（Glycosyltransferase，GTF）及基因表达的影响及其防龋机制。方法分别培养游离状态与生物膜状态下生长的变形链球菌、远缘链球菌，以含梯度浓度 EEP 的脑心浸液培养基（Brian Heart Infusion，BHI）作为实验组，50 mg／L NaF 的 BHI 培养基作为阳性对照组，以不添加任何药物的 BHI 培养基作为阴性对照组。各组与不同生长状态的细菌作用18 h。采用还原性辅酶 I 氧化法测定乳酸脱氢酶活性。硫酸铵盐析结合超滤离心法提取 GTFs 粗酶，蒽酮法测定 GTFs 活性。RT-qPCR 法测定各组 LDH 编码基因 ldh 表达和各组 GTFs 编码基因 gtfb 、gtfc 、gtfd 表达。结果在游离状态与生物膜状态下，变形链球菌、远缘链球菌各实验组和 NaF 组 LDH 活性均明显受到抑制（P ＜0．05）。在游离状态和生物膜状态下，EEP 组、NaF 组变形链球菌 GTFs 活性没有变化（P ＞0．05）。游离状态时，变形链球菌、远缘链球菌实验组和 NaF 组 ldh 表达明显受到抑制（P ＜0．05）；生物膜状态下，变形链球菌实验组在1、1／2、1／4MBEC 浓度时 ldh 表达受到抑制（P ＜0．05），远缘链球菌实验组在1、1／2、1／4、1／8MBEC 浓度时ldh 表达受到抑制（P ＜0．05），NaF 组细菌在 ldh 表达差异没有统计学意义（P ＞0．05）。游离状态与生物膜状态下，变形链球菌实验组 gtfb 、gtfc 、gtfd 基因表达与阴性对照组差异无统计学意义（P ＞0．05）。游离与生物膜生长状态下，变形链球菌 NaF 对 gtfb 基因表达有促进作用（P ＜0．05）。结论伊犁黑蜂蜂胶是通过抑制产变形链球菌属糖代谢途径 LDH 活性及其转录来抑制变形链球菌产酸，从而达到防龋的效果。
