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药物转运方式文献资料
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UPLC-MS/MS测定斯皮诺素在Caco-2细胞的转运特征
目的:建立一种测定Caco-2细胞中斯皮诺素的超高效液相色谱串联质谱(UPLC-MS/MS)检测方法,研究斯皮诺素在Caco-2细胞中的转运方式.方法:采用BEH C18色谱柱(2.1 mm×100 mm,1.7μm),流动相为水-甲醇溶液,梯度洗脱,流速0.30 mL·min-1;质谱测定采用电喷雾离子源,负离子模式,多反应监测(MRM)定量离子对m/z607→427,以Caco-2细胞模型研究斯皮诺素的双向转运,考察斯皮诺素浓度及P-糖蛋白(P-glycoprotein,P-gp)抑制剂对斯皮诺素转运的影响.运用UPLC-MS/MS检测药物浓度,计算其表观渗透系数.结果:UPLC-MS/MS检测斯皮诺素具有良好的线性(r2＞0.999 0)、精密度的RSD≤15％,准确度在88％～115％之间,绝对回收率均在80％以上,斯皮诺素低检测限为2 ng· mL-1.斯皮诺素在Caco-2细胞中,其转运方向主要是从绒毛面(AP)→基底面(BL),且与浓度相关.斯皮诺素质量浓度在2～40 μg·mL-1时,其表观渗透系数Papp(AP→BL)随浓度的增加而增加,外排率低于0.2,显示被动转运,但在80μg·mL-1时,其外排率为2.84,大于2,显示有P-gp参与外排;加入P-gp抑制剂后,其外排率显著降低.结论:在低浓度时,斯皮诺素在Caco-2细胞中的转运以被动扩散为主,但在高浓度时,受到P-gp糖蛋白的外排作用,吸收降低.
