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大鼠角膜文献资料
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HPLC-MS/MS法检测大鼠眼角膜中环孢素A的浓度
目的:建立HPLC-MS/MS法测定大鼠角膜中环孢素A浓度.方法:角膜样品匀浆后以固相萃取法处理样品,以环孢素D为内标物,采用内标法进行HPLC-MS/MS分析.采用Waters Xterra MS C18(3.5 μm,13.0mm×50 mm)色谱柱,流动相为混合溶液[甲酸-甲醇-4 mmol·L-1醋酸铵溶液(0.2∶10∶ 100)]-甲醇(15∶ 85).电离方式为ESI正离子模式；离子采集方式为选择性离子模式(SIR,环孢素A:m/z 1220.2,环孢素D:m/z 1233.8).结果:角膜匀浆液中环孢素A检测方法的线性范围为0.00576 ～0.288 μg·mL-1(r=0.9993),大鼠角膜中环孢素A的平均提取回收率接近80％(n=5),方法回收率为87.9％～ 113.6％,批内RSD(n =5)及批间RSD(n=15)均小于15％.结论:本方法专属性强,准确度高、重复性好,可快速准确地测定大鼠角膜中环孢素A的浓度.
