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HPLC法同时测定蒙古黄芪中6个有效成分的含量
目的:建立1种用HPLC同时测定蒙古黄芪中4个黄酮和2个皂苷含量的方法.方法:采用Inertsil ODS-SP(250 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱,以乙腈(A)-水(B)为流动相,梯度洗脱(0~9 min,25% A→45% A;9~20 min,45%A→75%A),黄芪甲苷(S1)、3'-羟基-4-甲氧基异黄酮-7-O-β-D-葡萄糖苷(S2)和黄芪皂苷Ⅱ(S3)的检测波长为205 nm(检测时间段0 ~9 min),4-甲氧基异黄酮-7-O-β-D-葡萄糖苷(S4)、9,10-二甲基紫檀烷-3-O-β-D-葡萄糖苷(S5)和7-羟基-3',4 '-二甲基-异黄烷醌(S6)的检测波长为245 nm(检测时间段9~ 20 min);柱温为40℃.结果:在选定的实验操作条件下,S1、S2、S3、S4、S5和S6对照液分别在20.00 ~ 100.00 μg·mL-1(r =0.9992)、1.00~ 10.00μg·mL-1(r=0.9997)、20.00 ~ 100.00 μg·mL-1(r=0.9991)、1.00~10.00μg· mL-1(r=0.9999)、10.00 ~ 60.00 μg·mL-1(r =0.9995)和1.00~10.00 μg· mL-1(r=0.9997)浓度范围内具有良好的线性关系,平均回收率分别为96.5%(RSD=2.0%),98.4%(RSD=1.4%),95.5% (RSD =2.1%),98.5% (RSD=1.1%),98.8%(RSD=1.3%),98.7% (RSD=1.1%).结论:采用HPLC在多波长检测条件下可同时测定4个黄酮(2个异黄酮、2个黄烷醇)和2个皂苷的含量,方法简便快速,可为评价该药材质量提供依据.