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精子线粒体文献资料
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低渗介导抽提牛精子线粒体DNA
目的:建立一种通过低渗介导的简便、有效的抽提冷冻牛精子线粒体DNA(mtDNA)的方法.方法:低渗处理牛精子,结合去污剂破膜释放精子线粒体,饱和酚去蛋白,无水乙醇沉淀DNA,设计线粒体特异性引物进行PCR分析以及通过Nla Ⅲ酶切对抽提获得的mtDNA作酶切鉴定,并以水解法作对照.结果:低渗法获得的mtDNA的PCR产物电泳分析和酶切鉴定都清楚地显示与预期相符的目的条带,而对照组水解法抽提冷冻牛精子mtDNA存在稳定性差及重复性差等缺点.结论:低渗介导是一种抽提精子mtDNA的有效方法.
