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灵芝多糖对体外树突状细胞毒性T-淋巴细胞的调节
目的:研究灵芝多糖(G1-PS)在抗原提呈阶段对体外培养树突状细胞(DC)诱导特异性细胞毒性T-淋巴细胞(CTL)功能的调节及其机制.方法:体外培养小鼠骨髓来源DC经P815肿瘤细胞冻融抗原冲击致敏,并与不同浓度G1-PS(0.8,3.2,或12.8 mg/L)共培养.成熟DC与脾淋巴细胞共培养诱导P815特异性CTL生成.第5天收集各组悬浮细胞及培养上清,采用乳酸脱氢酶法比较CTL特异性杀伤活性;RT-PCR法测定干扰素γ(IFNγ)及颗粒酶B mRNA在CTL的表达;ELISA或Western blot法检测IFNγ或颗粒酶B蛋白的表达.结果:3种浓度的G1-PS均可增高培养上清中释放的LDH活性(P<0.01);增加CTL表达IFNγ及颗粒酶B mRNA(IFNγ:G1-PS 12.8 mg/L组与RPMI-1640组,P<0.05;颗粒酶B:P<0.01);促进CTL培养上清中IFNγ蛋白生成(P<0.05)以及CTL表达颗粒酶B蛋白(G1-PS 12.8 mg/L组与RPMI-1640组,P<0.05).结论:G1-PS可在抗原提呈阶段促进P815肿瘤冻融抗原冲击致敏DC所诱导的特异性CTL的杀伤活性,其机制可能是通过IFNγ及颗粒酶B途径的调节.
关键词: 灵芝 多糖 树突状细胞 细胞毒性T-淋巴细胞 丝氨酸内源性多肽酶