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MiRNA-503胞内转染对大鼠脂肪干细胞成骨分化的影响
目的 探究小分子核糖核酸503(micro ribonucleic acid 503,MiRNA-503)的胞内转染对大鼠脂肪干细胞(adipose stem cells,ADSC)成骨分化的影响.方法 提取大鼠腹股沟脂肪组织,分离培养后成骨、成脂诱导分化;鉴定具有成骨、成脂能力ADSC的P2代细胞中转入MiRNA-503的为实验组(N),转入阴性对照核苷酸(Negative control CY3)的为对照组(NC),转染后细胞流式检测两组细胞表面抗体表达及成骨诱导鉴定.结果 ADSC长梭状,呈涡旋式分布,类似成纤维细胞;成骨、成脂诱导比较,成骨诱导组碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)染色(42.712±4.055)和成脂诱导组油红O染色(47.607±6.604),均高于对照组(7.383±1.840,2.780±0.278),差异有统计学意义(t=13.742,P<0.001;t=11.747,P=0.007).鉴定具有成骨、成脂能力ADSC P2代进行转染,流式细胞检测显示N组CD29表达量99.8％,CD90表达量99.9％,阳性表面抗原高表达;CD34表达量0.6％,CD45表达量0.4％,阴性表面抗原低表达.NC组CD29表达量99.6％,CD90表达量99.2％;CD34表达量0.3％,CD45表达量0.0％.反转录聚合酶链式反应(reverse transcription-polymerase chain reaction,RT-PCR)检测显示N组表达成骨相关基因RUNX2、BSP、OCN表达均高于NC组,差异有统计学意义(P<0.05).转染后成骨诱导7 d,ALP染色结果显示N组阳性细胞(104.014±13.773)高于NC组(44.111±1.925),差异有统计学意义(t=9.952,P=0.009).结论 MiRNA-503的胞内转染对ADSC成骨分化具有促进作用.
关键词： 小分子核糖核酸503 脂肪干细胞 胞内转染 成骨分化
