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柯萨奇病毒A16疫苗候选株免疫效果评价
目的 研究柯萨奇病毒A16型(CV-A16)疫苗候选株不同形态病毒颗粒与不同佐剂配伍后在小鼠模型中的免疫原性和保护性.方法 将不同佐剂与不同剂量的CV-A16疫苗候选株纯化抗原配制成疫苗,免疫小鼠后检测小鼠血清内抗CV-A16的总抗体水平以及中和抗体水平,并评价母传抗体对新生乳鼠的保护作用.结果 CV-A16疫苗候选株可在小鼠体内诱导高水平的体液免疫应答,免疫后的小鼠血清中和抗体水平可达8 192,并可交叉中和CV-A16病毒原型株(A型)以及异源亚基因型(B2b).疫苗免疫母鼠生产的乳鼠在被10 000 LD50的同源或异源CV-A16病毒攻击后,可免于发病和死亡.结论 CV-A16疫苗候选株具有良好的免疫原性和保护性,可作为CV-A16灭活疫苗或多价手足口病灭活疫苗的候选毒株.
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1株EV71临床分离株的全基因组序列测定和结构分析及对乳鼠致病性研究
目的 利用课题组前期分离获得的EV71临床分离毒株,对其全基因组序列测定及分析,建立EV71感染的动物模型,分析其基因序列与致病性的关系.方法 利用RT-PCR和cDNA末端快速扩增技术(RACE)分段扩增EV71全长基因,对各扩增片段进行克隆和测序；用软件MEGA 5、RNAstructure 5.3进行基因组结构及特点分析；腹腔注射毒株建立EV71感染的ICR乳鼠模型.结果 得到3个部分相互重叠并涵盖全基因组的重组质粒,测序后拼接成全基因序列,命名为EV71 BC08株存入GenBank (JQ514785).序列分析表明BC08株为EV71 C4a基因亚型,其5′非编码区(5′ UTR) A627点突变可能影响病毒5′ UTR二级结构.BC08株能感染乳鼠并导致其出现神经系统症状,病理学研究表明受染乳鼠肌肉和大脑组织有病毒VP1蛋白表达.结论 BC08毒株基因组全长7 406 bp,为C4a亚型,与近年我国EV71流行株有很高的同源性(＞95％),但A627点突变可能影响病毒5′ UTR二级结构及功能.BC08毒株可感染乳鼠并致病,这对该临床分离株的致病能力提供了直接证据,也为建立EV71感染的乳鼠模型奠定基础.
