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  • 氚示踪法评估RNAi介导Mfn2基因沉默对小鼠体内物质代谢的影响

    作者:陈小琳;徐焱成;雷幼蓉

    采用同位素示踪技术研究RNAi介导线粒体融合素基因-2(Mfn2)沉默小鼠体内物质代谢变化.构建了含Mfn2短发卡RNA(short hair RNA, shRNA)干扰质粒和阴性对照质粒.24只BALB/c小鼠分为转染组和阴性对照组,每组各12只,转染组经尾静脉注射Mfn2干扰质粒,对照组注入阴性对照质粒.质粒注入5 d后,将氚水(3H2O)或氚标记葡萄糖(3-3H-Glucose)经腹腔或尾静脉注射到小鼠体内,留取血标本和组织标本,用液体闪烁计数仪测定标本放射性浓度,计算小鼠组织脂肪酸合成率和肝脏葡萄糖生成率,两组间均数比较采用t检验.结果显示,Mfn2基因转染组小鼠肝脏葡萄糖生成率为49.43±16 31,明显高于阴性对照组的24.91±4.07(P<0.05),肝脏、肌肉、心脏、脂肪组织的脂肪酸合成率分别为0.10±0.00、9.12±1 90、1.18±0.28、11.11±1.31,显著低于阴性对照组0.79±0.07,70.52±13.95,53.88±9 90,45.43±5.91.以上结果表明,Mfn2基因在体内葡萄糖和脂肪酸代谢中起重要作用.

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