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  • 5种免提取试剂盒检验滤纸血痕结果的比较

    作者:巴华杰;林子清;刘亚楠;刘冰泉;马骏;朱爱华

    目的 探讨5种免提取试剂盒对滤纸血痕样本检验的效果.方法 陈旧滤纸血痕(存放时间12 ~ 14个月)及新鲜滤纸血痕(存放时间小于1个月)各920份,分别随机分为5组.应用AGCU 17+1、Goldeneye 20A、Powerplex 16HS、Identifiler Plus、Identifiler Direct 5种免提取试剂盒进行检验,对比各组检验结果.结果 陈旧滤纸血痕5种试剂盒的检验成功率为98.91% ~ 100%,各组间无差异(P>0.05);新鲜滤纸血痕,Identifiler Plus和Identifiler Direct试剂盒检验成功率高于AGCU17+1、Goldeneye 20A及Powerplex 16HS试剂盒(P<0.01);将样本做陈旧化处理后再用成功率较低的3种试剂盒进行检验,成功率分别升至100%、99.46%、99.46%;Identifiler Plus试剂盒扩增循环27次效果优于28次.结论 本文5种试剂盒均可用于滤纸血痕的直接扩增检验,但使用AGCU17+1、Goldeneve 20A及Powerplex 16HS试剂盒需将新鲜血痕做陈旧化处理;Identifiler Plus试剂盒需将循环次数降为27次.

  • 4种固相颗粒吸附法提取滤纸血痕DNA效果的比较

    作者:巴华杰;马骏;刘亚楠;朱爱华;林子清

    目的:探讨4种固相颗粒吸附法提取滤纸血痕样本DNA的效果。方法含有1μL静脉血的滤纸血痕180份,分为4组,每组45份。分别采用4种固相颗粒吸附法(DNA IQ?系统、D盾超敏DNA提取试剂盒、超高效硅珠纯化DNA提取试剂盒和常规的硅珠法)对上述样本进行DNA提取,对比各组DNA溶液的浓度及STR分型检验结果。结果 D盾超敏DNA提取试剂盒[(3.764±1.790)μg/mL]、超高效硅珠纯化DNA提取试剂盒(3.634±1.112)及常规硅珠法(3.350±1.250)提取到DNA溶液的浓度无统计学差异(P>0.05),但均高于DNA IQ?系统(1.864±1.207)(P<0.001);D盾超敏DNA提取试剂盒、超高效硅珠纯化DNA提取试剂盒及常规硅珠法样本图谱峰高大于DNA IQ?系统(P<0.001),超高效硅珠纯化DNA提取试剂盒和常规硅珠法样本图谱峰高大于D盾超敏DNA提取试剂盒(P<0.01)。结论 D盾超敏DNA提取试剂盒、超高效硅珠纯化DNA提取试剂盒及常规硅珠法对于滤纸血痕的DNA提取效率高于DNA IQ?系统;超高效硅珠纯化DNA提取试剂盒和常规硅珠提取到的DNA溶液可能具有更高的质量。

  • Chelex-100法提取滤纸血痕DNA影响因素的比较

    作者:巴华杰;刘冰泉;马骏;朱爱华;林子清

    目的 改进滤纸血痕DNA提取方法,建立更简便、廉价,适合当前DNA建库需要的提取方法.方法 将752份滤纸血痕分成四组.分别按照四种不同的Chelex-100法进行DNA提取并进行比较研究;63份新鲜血痕分别按照两种方法提取并进行对比研究.结果 对于陈旧滤纸血痕,四种提取方法的检测成功率无显著差异(P>0.05);对于新鲜血痕,两种提取方法的检测成功率有显著差异(P<0.05).结论 对于建库陈旧滤纸血痕样本的DNA提取可采用不加纯水处理,直接加入Chelex-100的方法进行.

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