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  • 纳米镍对大鼠睾丸生精-支持共培养细胞的凋亡作用及机制研究

    作者:高晓洁;孔璐;薛玉英

    目的:研究纳米镍对大鼠睾丸生精-支持共培养细胞的作用及其相关机制.方法:以体外共培养的大鼠睾丸生精-支持共培养细胞为实验对象,分别加入不同浓度的纳米镍(0、25、50、100、200、400和800 μg/mL)染毒24 h后,采用MTT法检测细胞存活率,Hoechst33258染色法检测细胞凋亡形态及Annexin V/PI双染法检测细胞凋亡率;lncRNA基因芯片检测细胞凋亡相关lncRNA的差异表达.结果:与对照组相比,不同浓度纳米镍染毒后,细胞存活率均降低(P<0.01),并呈剂量效应关系(P<0.01).Hoechst33258染色结果显示,与对照组比较,纳米镍染毒组细胞核或细胞质内显示出浓染致密的颗粒块状荧光及明显核形态变化.Annexin V/PI双染法流式检测结果显示,染毒浓度为25、50、100、200、400 μg/mL时,细胞凋亡率分别为8.80%±0.50%、11.00%±0.70%、12.53%±0.71%、15.95%±0.54%和17.80%±0.76%,各浓度组细胞凋亡率与对照组比较均明显增加(P<0.01),且呈浓度效应关系(P<0.01).LncRNA基因芯片检测结果显示,与凋亡相关的lncRNA共169个,其中,100 μg/mL纳米镍染毒组与对照组比较,上调的有117个,下调的有52个.结论:纳米镍能引起大鼠睾丸生精-支持共培养细胞凋亡,lncRNA可能在其中起重要作用.

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