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免疫杀手细胞的体外扩增方法及其对肝癌细胞BEL-7402的杀伤作用
目的:探讨免疫杀手细胞(immune-killer cells,IKCs)的体外扩增方法及其对人肝癌细胞BEL-7402的杀伤作用.方法:改良自然杀伤细胞培养扩增法扩增IKCs细胞,流式细胞仪分析IKCs表型,台盼蓝染色计数法观察细胞增殖状况,Alamar Blue法观察IKCs细胞对BEL-7402细胞的杀伤作用,用BALB/c裸鼠模型检测IKCs细胞对肝癌动物模型的治疗作用.结果:IKCs细胞培养14d的细胞总数扩增300倍以上,主要由CD3+CD56+、CD3-CD56+和CD8+细胞亚群组成,CD3+CD56+和CD3-CD56+比例达85%以上,CD8+比例达到77%以上.IKCs细胞对肝癌BEL-7402细胞的杀伤实验显示,当效靶比为25∶1时和100∶1时,其杀伤活性分别为66.5%和97.8%(P< 0.01).裸鼠肝瘤模型治疗实验显示,IKCs细胞对早期和晚期人肝癌BEL-7402细胞裸鼠模型均有显著的治疗作用,与对照组比较,其抑瘤率达69%以上(P<0.01).结论:本实验建立的肿瘤免疫杀手细胞IKCs的培养扩增方法是可行的、有效的,有望成为一种新的肿瘤免疫细胞治疗方法.