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pLacZ-3NF文献资料
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酵母单杂交诱饵质粒pHis-3NF和pLacZ-3NF的构建与鉴定
目的:构建可以与酵母染色体组发生重组的质粒pHis-NF和pLacZ-NF. 方法:人工合成44 bp的三重NF-κB元件寡聚核苷酸,通过DNA重组技术将靶序列NF-κB串定向插入细菌-酵母穿梭质粒pHisi和pLacZi的多克隆位点MCS后,用特异性酶切、琼脂糖凝胶电泳、PAGE电泳、DNA测序等方法进行鉴定. 结果:PAGE电泳和DNA测序分析证实定向插入的寡聚核苷酸串与预先设计的插入序列一致. 结论:成功地构建了重组质粒pHis-3NF和pLacZ-3NF,为借助酵母单杂交实验技术平台深入探讨NF-κB因子相关基因的转录调控机制奠定了实验材料和技术基础.
