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半巢式聚合酶链反应法文献资料
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乙型肝炎病毒共价闭合环状DNA检测方法的建立及应用
[目的] 建立和应用半巢式聚合酶链反应法(PCR)检测慢性乙型肝炎患者血清中乙型肝炎病毒(HBV)共价闭合环状DNA(cccDNA).[方法] 根据HBV基因组DNA正负链上下游缺口序列,设计3个相对保守的引物,建立HBV cccDNA半套式PCR,并用该法检测96例慢性乙型肝炎患者血清中HBV cccDNA.[结果] 96 例慢性乙型肝炎患者中,35 例HBV cccDNA阳性,阳性率为36.5%.HBV cccDNA阳性组的HBeAg、HBV DNA、ALT和AST水平均明显高于阴性组(P＜0.05),但两组的HBsAg水平无显著差异(P>0.05).HBV DNA≥105组的HBV cccDNA检出率为58.3%(35/60),明显高于HBV DNA<105组(0%,0/36)(P=0.000);HBeAg阳性组的HBV cccDNA检出率为50.9%(28/55),明显高于HBeAg阴性组(7/41,17.1%)(P=0.001).[结论] 半套式PCR方法简便,可用于测定血清中HBV cccDNA,以评价抗病毒治疗慢性乙型肝炎的疗效.
