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犀角地黄汤合银翘散对流感病毒性肺炎小鼠肺组织GRKs-βAR-Gsα信号通路的影响
目的 以流感病毒性肺炎小鼠作为模型,检测犀角地黄汤合银翘散(XDY)对小鼠肺组织中GRKs-βAR-Gsα通路的影响,以明确其改善肺血管通透性的分子机制.方法 将50只雄性Balb/C小鼠按体重随机分为5组,每组10只,分别为正常组、病毒组和犀角地黄汤高、中、低剂量组.每组除正常组外,均以A/FM/1/34(H1 N1)病毒株滴鼻感染.1 h后,正常组、病毒组用蒸馏水灌胃,2次/d;其余三组分别用高、中、低剂量的XDY灌胃,2次/d.在感染后的第3天、第5天分别摘眼球处死小鼠,荧光定量PCR检测各组小鼠肺组织β-AR mRNA含量;Western blot检测肺组织GRK2、Gsα的蛋白表达水平.结果 第3天:与病毒组相比,XDY中剂量组GRK2蛋白表达水平显著下降(P<0.001),β-AR含量升高(P<0.01),而Gsα的表达无明显差异(P>0.05);第5天:与病毒组相比, XDY中剂量组GRK2蛋白表达水平仍显著下降(P<0.01),β-AR含量显著升高(P<0.001),Gsα的表达明显升高(P<0.05),差异有统计学意义.结论 流感病毒感染后,犀角地黄汤合银翘散可通过抑制GRK2蛋白表达,升高β-AR、Gsα含量,改善流感病毒肺炎小鼠肺血管通透性,从而发挥抗炎作用.
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犀角地黄汤合银翘散对流感病毒感染小鼠肺组织MLC磷酸化信号通路的影响
目的：以流感病毒感染的小鼠为模型，检测犀角地黄汤合银翘（ XDY）对小鼠肺组织中肌球蛋白轻链（ MLC）磷酸化信号通路的影响，以明确其抗病毒作用的分子机制。方法将50只雄性Balb/c小鼠按体重随机分为5组，每组10只，分别为正常组、病毒组和XDY低、中、高剂量给药组，除正常组小鼠外，其余组用A/FM/1/34（H1N1）病毒株滴鼻感染。1 h后，病毒组蒸馏纯水灌胃，2次/d；其余三组分别用低、中、高剂量的XDY灌胃，2次/d。感染后第4天摘眼球处死小鼠，RT-PCR检测各组小鼠肺组织中病毒RNA水平；Western bolt 检测肺组织MLC、p-MLC、PKC、p-PKC、ROCK-1、ERM、p-ERM蛋白表达水平。结果与病毒组相比，XDY中剂量组病毒RNA含量显著降低，差异有统计学意义（ P﹤0.01），而高剂量组和低剂量组病毒RNA含量则无明显变化。XDY中剂量组Rho/ROCK、PKC以及p-MLC、p-ERM蛋白表达显著降低，差异有统计学意义（ P﹤0.05）。与正常组相比，病毒组小鼠肺组织中ROCK1、PKC表达显著增加，p-MLC、p-ERM蛋白表达显著升高，差异有统计学意义（ P﹤0.05）。结论 XDY可通过抑制Rho/ROCK、PKC信号通路活化，抑制p-MLC蛋白表达，减少流感病毒在体内的复制，从而起到抗病毒作用。
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截断疗法与常规疗法对小鼠流感病毒性肺炎治疗作用的比较?
目的：比较截断疗法和常规疗法对小鼠流感病毒性肺炎的治疗作用。方法 ICR小鼠80只,分为正常组、模型组、常规疗法组、截断疗法组,以流感病毒鼠肺适应株FM1病毒液滴鼻感染后1h灌胃给药,截断疗法组以犀角地黄汤合银翘散水煎剂灌胃；常规疗法组第1、2、3天以银翘散水煎剂灌胃,第4、5、6、7天以犀角地黄汤水煎剂灌胃,连续给药7 d,观察14 d,计算小鼠的生存率、平均存活天数、体重变化。 Balb/c 小鼠128只,分为以上4组,处理同上,分别于第2、4、6、8天处死动物并取材、检测。观察不同时间点小鼠肺组织病毒滴度、肺指数；观察第8天小鼠肺大体及肺组织病理变化。结果截断疗法组与常规疗法组比较,生存率升高一倍,平均存活天数明显升高；截断疗法组在第6、8天较常规疗法组肺指数明显降低,在第2、4、6、8天肺组织病毒滴度较常规疗法组均有所下降,但无统计学意义。结合肉眼观察肺大体病变及光镜下观察小鼠肺部病理改变,截断疗法组病变较常规疗法组显著减轻。结论截断疗法对重症小鼠流感病毒性肺炎的治疗作用优于常规疗法,其机制可能不在于对病毒的抑制作用强,而在于对病毒感染后机体发生的炎症级联反应抑制作用强。
